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genelink凝膠純化產(chǎn)品簡(jiǎn)介

 更新時(shí)間:2022-03-18 點(diǎn)擊量:1069

 

genelink凝膠純化產(chǎn)品簡(jiǎn)介

如果應(yīng)用是用于 PCR 或測(cè)序,所有短于 40mer 的 Gene Link 寡核苷酸通常不需要任何進(jìn)一步的純化。強(qiáng)烈建議將凝膠純化用于涉及產(chǎn)品克隆的所有應(yīng)用,例如誘變、克隆或基因構(gòu)建應(yīng)用。不建議使用反相柱或 HPLC 純化。

 

純化 50納摩爾 200 毫摩爾 1毫米摩爾 2毫米摩爾 10米摩爾_ 15米摩爾_
凝膠純化 75.00 美元 75.00 美元 $150.00 $280.00 $1500.00 $1800.00
反相墨盒 (RPC)*  $30.00 $30.00 $90.00 $170.00 $750.00 $900.00

 

* 不建議對(duì)超過(guò) 35mer 的寡核苷酸進(jìn)行反相柱純化。

 

純化
產(chǎn)品 目錄號(hào) 價(jià)格 $
聚丙烯酰胺凝膠純化;50 & 200 nmol 規(guī)模 26-6400-77 75.00
聚丙烯酰胺凝膠純化;1 m摩爾刻度 26-6400-55 150.00
聚丙烯酰胺凝膠純化;2 m摩爾刻度 26-6400-88 280.00
聚丙烯酰胺凝膠純化;10 m摩爾刻度 26-6400-44 1500.00
聚丙烯酰胺凝膠純化;15 m摩爾刻度 26-6400-99 1800.00
反相筒純化;50 & 200 nmol 規(guī)模 26-6400-11 30.00
反相筒純化;1 m摩爾刻度 26-6400-22 90.00
反相筒純化;2 m摩爾刻度 26-6400-23 170.00
反相筒純化;10 m摩爾刻度 26-6400-33 750.00
反相筒純化;15 m摩爾刻度 26-6400-34 900.00

 

 

寡核苷酸純化

 

DNA 的自動(dòng)化化學(xué)合成得到了迅速改進(jìn),化學(xué)方面取得了巨大的進(jìn)步,使常規(guī)偶聯(lián)產(chǎn)率超過(guò) 99%,并且每個(gè)合成周期不到 3 分鐘的自動(dòng)化非??煽俊T?20-30 聚體范圍內(nèi)獲得的最終寡核苷酸產(chǎn)物基本上是純的,具有非常低的截短序列,因此對(duì)于大多數(shù)涉及聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (PCR*) 和 DNA 測(cè)序的常規(guī)應(yīng)用不需要進(jìn)一步純化。其他應(yīng)用可能需要純化,建議用于克隆、定點(diǎn)誘變、連接等。

           

寡核苷酸的純化可以通過(guò)多種方法完成,根據(jù)具體要求進(jìn)行選擇??捎煤徒?jīng)常使用的常用技術(shù)是聚丙烯酰胺凝膠純化 (PAGE)、HPLC 和反相柱 (RPC)。下表總結(jié)了上述每種技術(shù)的純化范圍。

 

 

頁(yè)

高效液相色譜

RPC

8-40mer

是的

是的

是的

41-200mer

是的

 

聚丙烯酰胺凝膠純化

這種方法的純化被認(rèn)為是寡核苷酸純化的黃金標(biāo)準(zhǔn)。PAGE 純化可用于任何長(zhǎng)度的寡核苷酸(與僅限于寡核苷酸的 HPLC 和 RPC 柱相比,優(yōu)選低于 35 聚體)。這種技術(shù)也是勞動(dòng)強(qiáng)度高的方法。制備適當(dāng)百分比的聚丙烯酰胺凝膠 (10-20%) 并對(duì)寡核苷酸進(jìn)行電泳。主要產(chǎn)物是最慢的遷移帶,通過(guò)紫外線陰影識(shí)別并切除。然后凝膠切片通常通過(guò)壓碎和浸泡法進(jìn)行寡核苷酸洗脫處理。

 

高效液相色譜

HPLC 純化通?;诶檬杷|(zhì)的反相。寡核苷酸是用三苯甲基 ON(合成寡核苷酸最后一個(gè)堿基的 5' OH 處的三苯甲基)合成的,洗脫圖譜首先洗脫所有非三苯甲基化截短序列,然后洗脫疏水結(jié)合的全長(zhǎng)寡核苷酸。該方法產(chǎn)生大于 95% 的純度,具體取決于寡核苷酸的序列和長(zhǎng)度?;诜聪嗟?HPLC 在 35-40mer 寡核苷酸以上失敗,因?yàn)檩^長(zhǎng)的寡核苷酸本質(zhì)上是疏水的并且非特異性結(jié)合。

 

反相墨盒

這是 HPLC 反相純化的廉價(jià)替代品。用于反相純化的小柱通常包含疏水性基質(zhì),例如 C18 二氧化硅,純化原理與 HPLC 相同,根據(jù)寡核苷酸的序列和長(zhǎng)度,純化可達(dá)到約 95% 的純度。基于反相柱的純化在 35-40mer 寡核苷酸以上也失敗,因?yàn)檩^長(zhǎng)的寡核苷酸本質(zhì)上是疏水的并且非特異性結(jié)合。

 

推薦

 如果應(yīng)用是用于 PCR 或測(cè)序,所有短于 40mer 的 Gene Link 寡核苷酸通常不需要任何進(jìn)一步的純化。強(qiáng)烈建議將凝膠純化用于涉及產(chǎn)品克隆的所有應(yīng)用,例如誘變、克隆或基因構(gòu)建應(yīng)用。不建議使用反相柱或 HPLC 純化。  

價(jià)目單價(jià)目表

純化

 

50納摩爾

200 毫摩爾

1毫米摩爾

10米摩爾_

15米摩爾_

凝膠純化

75.00 美元

75.00 美元

$150.00

$1500.00

$1500.00

反相墨盒 (RPC)

$30.00

$30.00

$90.00

$750.00

$750.00

 

**聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (PCR) 過(guò)程受保護(hù)

霍夫曼-拉羅氏。使用授權(quán)試劑自動(dòng)授予執(zhí)行許可。

 

 

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