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ScienTech KTS-01說明書
PAP (Pyrophosphorolysis-activated polymerization)/ KlenTaq-S
PAP（焦磷酸解 -活化聚合）/ KlenTaq -S
PAP是一種*的DNA擴增方法（Liu和Sommer：BioTechniques，29 [2000]，1072-1080; Nucleic Acids Res，30 [2002]，598-604），其中焦磷酸解 和聚合通過DNA聚合酶使用3連續(xù)偶聯(lián)。 '封閉的底漆。 焦磷酸解是DNA聚合的逆反應，其中在無機焦磷酸鹽存在下酶除去引物模板雙鏈體3'末端的封閉核苷酸（通常是雙脫氧）。在通過焦磷酸解作用除去封閉的核苷酸后，然后可以通過DNA聚合延長活化的引物。
由于PAP 的高特異性（1 / 3x10 11） ，該過程正成為 在大量過量野生型等位基因存在下檢測稀有突變，大雜合缺失，基因重復等的有力工具（Liu et al：Biotechniques），40 [2006]，661-668）。理論上，PAP可以檢測3× 10 11個野生型等位基因中的單個堿基突變。
PAP可以被用來作為一種替代或證實的實時PCR （Boon等人： Prenat DIAGN 27 [2007]，932-937）
KlenTaq -S和PAP反應。
已經發(fā)現(xiàn)KlenTaq -S是 PAP反應中許多研究小組的合適的熱穩(wěn)定 Taq DNA聚合酶。
KlenTaq -S由該基因的5'缺失和F667Y（Tabor和Richardson）突變表達，編碼Thermus aquaticus DNA聚合酶。反復暴露于98 0在PR1反應C緩沖區(qū)的酶不顯示活性的任何顯著損失。
KlenTaq - S的濃度： 10U /μl
建議的PAP反應條件（25μl ）：
50 mM Tris-HCl，7.8,16 mM硫酸銨，3.5 mM 氯化鎂， 25μM，每種四種dNTP，每種引物0.1μM，5-200 ng 模板，90μM無機焦磷酸鹽（Na 4 PPi），2％二甲基亞砜（DMSO） ），2.5 U KlenTaq -S。
騎行條件：
95 0 Ç 為 1分鐘（變性），然后
94 0 C持續(xù)15秒
60 0 C持續(xù)30秒
64 0 C持續(xù)30秒
68 0 C 1分鐘
72 0 C持續(xù)1-2分鐘，共25-45個循環(huán)
提供緩沖液 （ 10X PR1）：
500 毫米 的Tris-HCl，pH值7.8，160 mM的 （ NH 4）2 SO 4，35 毫的MgCl 2，1.5毫克/毫升BSA
訂購信息：
訂貨號 ：KTS-01
數(shù)量： 100μl或1000 U /小瓶
價格： $ 200 /小瓶（1000 U）
運費： 美國35美元（FedEx隔夜）
